DiO細胞膜綠色熒光染色

服務介紹：

DiO是一種親脂性膜染料，可以標記細胞膜和其他脂溶性生物結構。進入細胞膜后可以側向擴散，逐漸使整個細胞膜被染色。DiO在進入細胞膜之前熒光非常弱，當與細胞結合后熒光強度會大大增強，被激發(fā)后可以發(fā)出綠色熒光，并可以用標準的FITC濾光片檢測。DiO最大激發(fā)波長484nm，最大發(fā)射波長501nm。

實驗流程：

1.細胞固定并破膜：培養(yǎng)好的細胞爬片倒去培養(yǎng)基，用PBS洗。4%多聚甲醛固定30min，PBS洗3次，每次5min，滴加0.1%TRITON，破膜20min. PBS洗滌2-3次。

2.加dio染料工作液：爬片稍甩干后用組化筆在蓋玻片中間細胞分布均勻的位置畫圈（防止液體流走），加50-100μ dio染料工作液，37℃孵育5-20分鐘，PBS洗3次，每次5 min。

3.DAPI復染細胞核：爬片用PBS（PH7.4）洗滌3次，每次5min。去除PBS后在圈內滴加DAPI染液，避光室溫孵育10min

送樣運輸要求：

固定好細胞， 換成PBS，4℃ 運輸到實驗室。目前只接受細胞爬片。